一、病原:腺病*(adenovirus)是一种没有包膜的直径为70~90nm的颗粒,由个壳粒呈廿面体排列构成。衣壳里是线状双链DNA分子,腺病*分两个属,共约余血清型。一般会造成呼吸系统的不适,对家禽主要造成:嗉囔炎、肠炎、肺炎。
二、流行病学(Ⅰ群腺病*在中国鸡群的流行病学调查易邦生物)
----以血清学检测、临床诊断、解剖学诊断、病理组织学、分子生物学、病*分离等监测手段对全国养殖重点区域的鸡群进行I群腺病*进行跟踪监测,及时掌握疾病感染的范围和现状。年至今从黑、吉、京、鲁、晋、豫、苏、沪、粤九省共收集了份疑似样品,阳性数为份。结果显示,I群腺病*在中国鸡群中发病率非常之高,且呈逐年上升趋势。主要造成鸡群的包涵体肝炎和心包积液两种临床类型,给养鸡企业造成较大的经济损失。
----腺病*是全世界家禽和野禽常见的传染病原。许多腺病*可在健康禽体内复制,症状非常轻微或不变现感染症状,但有一些因素,特别是并发感染时,腺病*可成为条件性病原。有些腺病*本身就是原发病原,如火鸡出血性肠炎病*,鹌鹑支气管炎和EDS-76D。
----禽腺病*分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ三个群;Ⅱ、Ⅲ群明确可以造成火鸡出血性肠炎和减蛋综合症。I群中有A、B、C、D、E五个种,12个血清型。大多数Ⅰ群的致病性还未完全明确,但不同血清型的致病性有较大差异。
----为了解I群腺病*在中国鸡群的发病情况,青岛易邦生物工程有限公司动物疾病检测中心年至今从黑、吉、京、鲁、晋、豫、苏沪、粤九省收集了多份临床发病疑似的样品,进行系统的实验室诊断,最后确诊的阳性样品为份。为系统了解I群腺病*在中国鸡群的发病情况提供了一些基础资料。
1.材料与方法
----1.1样品来源
----年3月-年12月青岛易邦从黑、吉、京、鲁、晋、豫、苏、沪、粤九省采集的临床疑似I群腺病*的样品进行实验室检测。样品采集主要是公司技术人员和集团客户采集。
----1.2血清学检测
----取病鸡肝脏1:3匀浆后,反复冻融三次,r/m离心5分钟取上清与标准I群腺病*阳性血清进行琼脂扩散试验,湿盒中37℃孵育48h观察结果。
----1.3临床诊断
----对发病鸡群进行现场流行病学调查、临床症状观察,并进行记录汇总。
----1.4解剖学诊断
----对病鸡进行解剖,观察组织脏器的病变。
----1.5病理组织学
----取肝组织于10%福尔马林液固定,石蜡包埋、切片,HE染色,光镜观察。
----1.6病*分离
----病鸡肝脏进行病*分离用无菌生理盐水按1∶3稀释,研磨成匀浆,反复冻溶2~3次,每分钟转离心10分钟,取上清液,按单位/ml各加入青霉素、链霉素,置4℃冰箱过夜。无菌检查合格后,卵*囊接种6-8日龄SPF鸡胚10只,0.2ml/只,于37℃温箱培养,每天照胚2次,观察5-7天。
----1.7PCR核酸检测及基因测序
----病鸡肝脏无菌研磨,反复冻融3次,利用试剂盒提取RNA,设计I群(Hexon蛋白)FAdV4、8两对引物,利用一步法进行PCR检测,1%琼脂糖凝胶电泳观察结果。将阳性样品进行基因测序,并利用生物工程分析如见进行基因分析。
----1.8动物回归
----用临床表现为包涵体的肝脏组织液离心取上清液,经0.22微米(0.22μm)滤器过滤,攻*15日龄SPF鸡15只,设同居对照SPF鸡3只,同时设舍外对照7只,观察实验结果。
2.结果
----2.1血清学检测
----送检病料与标准I群阳性血清进行琼脂扩散试验可以看出,阳性率较高,且逐年上升。
----2.2临床症状
----2.2.1包涵体肝炎:主要在白羽肉鸡多发,主要经垂直传播发病。发病日龄主要集中在在6-14天,死亡率1-8%,发病后3-4天出现死亡高峰,病程一般持续5-7天。有时法氏囊病活苗的免疫能加重病情。病鸡最突出的症状是腹泻,排浅*色粘液样便,贫血、*疸,大腿肌肉出血和迅速死亡。
----2.2.2心包积液:蛋鸡、肉种鸡和*鸡都有发病。流行病学调查结果显示水平传播为主要传染方式。感染鸡排*期长达5-9周。2-30周均可发病。发病日龄主要集中在20-60日龄,最早可见7日龄的雏鸡发病;日死亡率达2-3%,病程长达20天,死淘率达15-30%;发病日龄越早,死淘率越高。表现为死亡突然,死亡快。
----2.3解剖学诊断
----2.3.1包涵体肝炎:病鸡拉硫磺色粪便,肝脏苍白,土*色、质脆、肿大。肝脏、肌肉有出血斑,个别鸡皮下有*色胶冻样渗出。
----2.3.2心包积液:心包腔中有*色透明的积液,肺水肿,肝脏出血、肿胀色浅。肾脏出血、胰脏出血坏死。
-----腺胃水肿、腺胃肌胃交界处出血
----2.4病理组织学
----通过对肝脏的组织病理学检查,肝细胞可见大、而圆的嗜碱性包涵体(见图2A、B)。
----2.5病*分离
----结果发现卵*囊接种后4~7天胚胎死亡,死亡胚胎缩小,周身出血。
----2.6PCR检测、基因测序及分析
----2.6.1PCR检测:对送检的样品处理后进行核酸检测,电泳结果显示样品中检测到目的片段,且阴阳性对照成立。图4为部分样品检测结果图。
----2.6.2基因测序与分析
----阳性样品核酸产物送至大连宝生物进行基因测序,测序结果利用生物工程分析软件MEGA6进行基因分析,结果显示在中国流行I群腺病*主要有两个血清型;临床表现包涵体肝炎均为FAdV-8/b,心包积液综合征为FAdV-4型。
----2.7SPF鸡回归试验
----攻*组和同居组在攻*后6-10天出现发病,表现为嗜睡,精神萎靡,采食废绝。病死鸡剖检肝脏*色坏死,脾脏坏死,骨髓*染,病原检测FAdV阳性。
3.讨论与分析
----3.1通过对I群腺病*的流行病学调查,可以发现该病在中国鸡群中发病率较高,且呈逐渐上升趋势。发病的宿主范围越来越广,白羽肉鸡、蛋鸡、*羽鸡、肉种鸡均可感染发病。
----3.2中国流行I群腺病*主要有三个血清型;临床表现包涵体肝炎均为FAdV-8b和FAdV-11和这与澳大利亚发生情况相同,8年澳大利亚3周龄以下的鸡群爆发包涵体肝炎(IBH),死亡率达到30%,检测血清为FAdV-6、7和8型;9年新西兰爆发IBH分离*株多数为8型。临床表现为心包积液综合症的均为FAdV-4,这与7年以后在巴基斯坦、印度、科威特、伊朗及南美等国家爆发的血清型一致。研究表明,FAdV-4型*力较强,本身就可以引起易感鸡群的发病。
----3.3针对I群腺病*的防控;加强鸡场生物安全的控制是防治该病关键。经调查发现,发病鸡群多数发生在养殖密度大的地区和饲养时间长的养殖场,这些鸡场无有效的生物安全措施,环境污染严重。
----3.4鸡群应做好免疫抑制性疾病的防控,特别是法氏囊病、传染性贫血等疾病的感染,这些因素均可导致腺病*的感染和发病。
----3.5针对I群腺病*的免疫问题;越来越多的证据表明,某些型病*可能是原发病原,因而免疫预防显得更重要。母源抗体≧1:32可以有效预防IBH。在巴基斯坦疫苗的使用在心包积液的预防中起到了显著作用。建议在污染比较严重的地区,进行疫苗的免疫,提高下一代的母源抗体,以保护鸡群的感染和发病。灭活疫苗对该病有较好的防控效果。灭活疫苗有两种;一种是利用本场发病鸡的肝脏制备自家苗。另一种是利用分离I群禽腺病**株制备的油乳剂灭活疫苗。
三、免疫程序
四、预防方案:
由于此病是条件性致病病*,强烈抗应激和提高机体免疫力是预防本病的关键:
1、长期使用维喜肽0斤料加入一公斤,强烈抗应激
2、长期使用长效干扰素1吨料加入克
3、有条件的可以使用自家苗或高免蛋*。
此方案效果非常突出,山东、许昌长葛、禹州等地近个个鸡场使用,都很好,平安度过育雏及青年鸡,产蛋性能很好。
五、治疗:
1、有效抗病*:小柴胡散+正泰合用连用5天
2、治疗大肠杆菌:长江+立沙+阿莫西林+护健
3、使用5天药后使用新城疫疫苗+肾型传支5倍左右一次
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